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人白細(xì)胞介素1受體拮抗蛋白 Human IL-1RA

背景介紹：

白細(xì)胞介素１受體拮抗劑（IL-1Ra）是 IL-1 基因家族成員，它能與 IL-1R 結(jié)合，阻斷 IL-1 的活性，是IL-1 的特異性抑制劑，且不會(huì)觸發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生任何信號(hào)。IL-1ra 與 IL-1a、IL-lβ同源性約為 30％，可以特異性的結(jié)合 IL-1 受體而不產(chǎn)生任何激動(dòng)作用,成熟的人 IL-1Ra 與小鼠和犬 IL-1Ra 氨基酸序列同源性分別為 77%和 82%，并且人的 IL-1Ra 可抑制小鼠 IL-1 的活性，IL-1Rａ在許多與 IL-1 有關(guān)的疾病的治療中有著重大的意義。

檢測(cè)原理：

Solarbio (Solarbio ®) ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。將抗人 IL-1Rα單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上；分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本，標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的人 IL-1Rα會(huì)與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合；洗板后加入生物素化抗人 IL-1Rα抗體，該抗體會(huì)與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的人 IL-1Rα發(fā)生特異性結(jié)合；洗板后加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素，生物素與鏈霉親和素會(huì)發(fā)生高強(qiáng)度的非共價(jià)結(jié)合；洗板后加入顯色劑底物 TMB，若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的人 IL-1Rα，則 HRP 會(huì)使無(wú)色 TMB 變成不同深淺（正相關(guān)）的藍(lán)色物質(zhì)，加入終止液后反應(yīng)孔會(huì)變成黃色；后，在λmax=450 nm（OD=450 nm）處測(cè)定反應(yīng)孔樣品吸光度（OD），樣本中的人 IL-1RΑ濃度與OD 成正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計(jì)算出樣本中人 IL-1Rα的濃度。

人白細(xì)胞介素1受體拮抗蛋白 Human IL-1RA

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過期的試劑。

2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。

3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。

4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持*。

5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜（※）及潔凈塑料容器。. 6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。

7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。

8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

安全提示：

試劑盒中的終止液為酸性溶液，操作人員在使用時(shí)請(qǐng)帶上手套并注意防護(hù)；在操作過程中也要避免試

劑接觸皮膚和眼睛，如果不慎接觸，請(qǐng)用大量清水清洗；檢測(cè)血液樣本及其它體液樣本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物

實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)有關(guān)管理規(guī)定執(zhí)行。